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牛捻轉(zhuǎn)胃蟲PCR檢測試劑盒做標(biāo)準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意
更新時間:2021-03-24   點擊次數(shù):1047次

牛捻轉(zhuǎn)胃蟲PCR檢測試劑盒做標(biāo)準曲線樣品檢測時注意問題:
1、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準曲線計算出來的,所以首先要把做標(biāo)準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結(jié)果無從談起。
2、設(shè)置標(biāo)準曲線樣品的標(biāo)準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對于呈S型的標(biāo)準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
3、采用倍比稀釋法配制標(biāo)準曲線中的標(biāo)準樣品濃度,這樣就能夠保證標(biāo)準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
4、檢測標(biāo)準樣品時,應(yīng)按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
5、標(biāo)準曲線的樣品數(shù)一般為7個點,但至少要保證有5個點。
6、做出的標(biāo)準曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?,但一般來說,相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999。

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